二氧化氯和過氧乙酸對礦泉水衛生指標菌殺滅效果的觀察

發表時間:2019-07-10 21:57作者:雅潔來源:天津雅潔科技有限公司網址:http://www.xn908.com
文章附圖

IMG_2255.jpg跟著天然礦泉水日漸成為人們日常飲用水的主要來歷,礦泉水的安全問題遭到了越來越多的關注。新的《飲用天然礦泉水》國家標準[1]已于2009年10月1日正式施行,其間的微生物目標增加了銅綠假單胞菌、糞鏈球菌和產氣莢膜梭菌三項致病菌的檢測,而取消了細菌總數,其意圖在于著重產品的微生物安全,與國際標準接軌。

二氧化氯具有很強的氧化作用,而且它不會發生氯的代替反應,因而不會發生致癌、致畸變的有機氯代產品,被聯合國衛生組織(WHO)列為A1級安全消毒劑[2]。過氧乙酸則是一種用途廣泛的酸性氧化型消毒劑,可用于一般物體外表和食物加工機械管道、東西、包裝物、餐具及環境消毒,并在多個范疇得到了廣泛的推廣應用[3]。因而,礦泉水出產企業常將二氧化氯和過氧乙酸消毒液用于回收桶的消毒。

研討標明[4~5],在我國天然礦泉水的水源中,銅綠假單胞菌的陽性率約為20%~25%;而糞鏈球菌和產氣莢膜梭菌也是水源污染的指示菌。因而,在出產過程中,因為交叉污染等一些原因,回收桶也可能帶有這些致病菌。本文的意圖旨在研討二氧化氯和過氧乙酸對這三種礦泉水衛生目標菌的殺滅作用,從而為實際出產中兩種消毒劑的消毒濃度和時刻提供參考,避免因為消毒不徹底而造成衛生安全事故。

1 資料與辦法

1.1 消毒劑的制造

實驗所用的穩定性二氧化氯和過氧乙酸消毒液均由廣東環凱微生物科技有限公司提供。穩定性二氧化氯為二元制劑,按消毒劑:活化劑=10:1(v/v)活化10 min后,按五步碘量法[6]對二氧化氯的有用含量進行測定,然后稀釋到所需求的濃度備用。過氧乙酸消毒液為一元制劑,按直接碘量法[7](GB/T 19104-2006)對過氧乙酸的有用含量進行測定,然后稀釋到所需求的濃度備用。

1.2 菌懸液制備

實驗菌為銅綠假單胞菌(ATCC 15442),糞鏈球菌(ATCC 25912)和產氣莢膜梭菌(ATCC 13124)。銅綠假單胞菌和糞鏈球菌取養分瓊脂培育基斜面新鮮培育物(18~24 h),用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗下斜面上菌苔,并稀釋制造成實驗濃度菌懸液。產氣莢膜梭菌直接取皰肉肉湯培育基中的新鮮培育物(18~24 h),用PBS稀釋制造成實驗濃度菌懸液。

1.3 中和劑斷定實驗

實驗菌為銅綠假單胞菌、糞鏈球菌、產氣莢膜梭菌,實驗設6組,按照《消毒技術規范》(2002版)[8]中規則的中和劑斷定實驗程序進行實驗和成果斷定。

1.4 懸液定量滅菌實驗

實驗在20 ℃水浴條件下進行。按照《消毒技術規范》(2002版)中的懸液定量滅菌實驗辦法,在滅菌大試管中參加0.5 mL菌懸液,再參加0.5 mL有機干擾物質(3%牛血清白蛋白),混勻。參加4.0 mL相應濃度的消毒劑,作用至預定時刻。取菌藥混合物0.5 mL至4.5 mL中和劑試管內,混勻,中和10 min。梯度稀釋,取1.0 mL接種無菌平皿,傾瀉瓊脂培育基并混勻。其間,銅綠假單胞菌和糞鏈球菌選用胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)培育基,產氣莢膜梭菌選用亞硫酸鹽多粘菌素磺胺嘧啶瓊脂根底(SPS根底)培育基。待培育基凝固后,銅綠假單胞菌和糞鏈球菌于37 ℃培育48 h,產氣莢膜梭菌于37 ℃厭氧培育48 h,觀察成果。計數平板菌落數,核算殺滅率。實驗重復3次。

2 成果

2.1 中和劑斷定實驗成果

以三種實驗菌株為代表的中和劑斷定實驗成果標明,用含2 g/L硫代硫酸鈉+3 g/L卵磷脂+10 g/L吐溫80的PBS溶液組成的中和劑,可有用中和實驗濃度二氧化氯和過氧乙酸消毒劑的殘余作用,中和劑和中和產品對實驗菌及培育基均無影響。

2.2 懸液定量滅菌實驗成果

不同濃度二氧化氯和過氧乙酸對銅綠假單胞菌、糞鏈球菌、產氣莢膜梭菌的殺滅作用不同,實驗標明,二氧化氯對銅綠假單胞菌、糞鏈球菌和產氣莢膜梭菌殺滅率到達100%的條件分別為50 mg/L、1 min(成果在表1中未列出),35 mg/L、3 min和35 mg/L、3 min。而過氧乙酸消毒液100 mg/L作用3 min或許200 mg/L作用1 min對三種致病菌均能殺滅率達100%。

3 討論

二氧化氯和過氧乙酸屬于氧化型消毒劑,他們具有廣譜高效,快速殺滅各種微生物的特點。從實驗成果來看,這兩種對礦泉水衛生目標新增的三種致病菌具有杰出的滅菌作用,在較低濃度和較短時刻內能有用殺滅這些微生物。但是,一般以為,二氧化氯的滅菌作用受有機物的影響非常顯著,但這樣可能與有機物的類型和濃度有關[3]。同樣地,過氧乙酸的滅菌作用也或多或少遭到有機物的影響。因而,在實際使用過程中,在桶裝飲用水出產過程中,對回收桶進行消毒前有必要進行有用的清洗,以降低有機物的含量,從而確保消毒作用。

銅綠假單胞菌在許多水源水中能被檢出,而且它極易發生耐藥性,其發生耐藥性的機理很復雜,已經成為研討微生物耐藥性的形式菌種。從實驗成果來看,銅綠假單胞菌對二氧化氯和過氧乙酸的反抗力也較糞鏈球菌和產氣莢膜梭菌要強。因而,在出產過程中,應加強對銅綠假單胞菌的檢測。

產氣莢膜梭菌為能發生芽孢的食源性致病菌,其孢子在水中的時刻存活較大腸菌群長得多,并能反抗消毒劑。因為產氣莢膜梭菌孢子存活時刻長,最適宜用作斷續污染和長時間污染的目標。因而,研討二氧化氯消毒劑對產氣莢膜梭菌孢子的殺滅作用更具有實際意義。

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